Então.
Tetrâmeros.
Mais uma
vez venho enfrentar o frio cruel de Minneapolis, porque quero aprender a
trabalhar direito com essas coisas, e, pra mim, ninguém faz isso melhor que o
Marc Jenkins, um de meus eternos mentores.
Quando
falei para algumas pessoas o que eu vinha fazer aqui, teve gente que me falou –
mas não é só corar com essa coisa? Que nem anticorpo?
Bah gente,
não é. Primeiro, que a tecnologia de fazer o tetrâmero ainda não está
completamente dominada. Sempre fiquei encanada que, pro LCMV, o tetrâmero do
gp33 pra T CD8 que vem de graça do NIH (O NIH te dá de graça os tetrâmeros que
eles fazem – veja no site deles) não coram legal como um que se compra
comercial. Agora entendi que isso
depende inclusive dos reagentes usados pra fazer a tetramerização. O Marc
juntou um grupo de garotos sensacionais obcecados com controle de qualidade e
otimização e os meninos testaram TUDO que é necessário pra fazer primeiro o
monômero, e depois tetramerizar. Aprendi horrores em uma semana.
Então
começa quando se planeja a confecção do monômero. Tem que fazer de um jeito que
o peptídeo fique bem presinho na hora do pareamento da cadeia alfa com a beta
do classe II, e isso tem que ser planejado na clonagem. Depois a biotinilação
tem que ser eficaz. Se isso for legal, e teu reagente de tetramerização e
fluorocromo for bom, o tetrâmero sai lindo, forte, arretado.
Como esses
reagentes são pra eventos raros, na hora da citometria, tem que ser muuuuuito
preciosista pra não ter coloração falsa. Isso é critico pra você ter uma estimativa
real da freqüência dessas células T especificas. E tem limites pra o que vc pode
fazer e como trabalhar – pensa bem vc ta dando um super sinal pelo TCR pras células
T – elas podem morrer enquanto vc cora.
Tetrâmeros são
do bem porque vc diminui o uso de animais – olha a polemica da semana. O bicho
TCR transgênico retrocruzado no RAG fica doente, é chato de manter, aqui custa
uma fortuna manter, no Brasil é quase impossivel. Com tetrâmero, vc elimina ter
que criar esses animais. Menos dor e sofrimento no planeta.
Finalmente,
pra mim, no futuro, é como mediremos a eficácia das vacinas. Então, quero
aprender. Estou adorando, e na volta ensino pra quem quiser.
Beijos
gelados a todos.
Realmente é uma ferramenta muito útil. Quero entrar nessa fila para aprender!
ResponderExcluirVou te botar no trabalho (som de chicote)
ExcluirManda um abraço para o Marc, Cris.
ResponderExcluirmando sim! bjoca
ExcluirMuito legal Cris, e tem ainda os dextrâmeros que são também bem eficientes!
ResponderExcluirbah nem cheguei la ainda kelly, ainda to quebrando a cabeça aqui. mas quero botar uma mini-fabrica de 2W em Porto Alegre pra nós. bjo!
ExcluirBem legal isso. E você fazendo não será afetada se o NIH tiver shutdown novamente. Kkkkk
ResponderExcluirnem me fala. ate o pubmed sofreu. ridiculo isso ne? os americanos nunca vao ter um presidente como o Obama de novo - e nao dao valor!
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