Fica a dica: CRISPR-Cas9!!!

CRISPR-Cas9 é uma tecnologia emergente, que visa a edição de genomas. Seja pelo silenciamento de um gene ou pela inserção de genes exógenos aos genoma de interesse.

Originalmente, CRIPR-Cas9 é uma maquinaria celular, presente em bactérias e arqueobactérias, que têm como função inativar de maneira específica a inserção de genes exógenos ao genoma, que normalmente ocorre por infecções virais ou aquisição plasmidial.  Devido à característica de especificidade após a inserção genômica, é considerado um sistema imunológico adquirido contra infecções virais

Desde as primeiras publicações em janeiro de 2013 (Mali et. al, 213; Cong et. al, 2013), demonstrando a posssibilidade de se utilizar CRISPR-Cas9 para a edição de genomas eucariotos, vêm surgindo inúmeras publicações utilizando tal tecnologia. Somente no último mês de Setembro, mais de 30 artigos foram publicados usando a técnica. Em especial, resalta-se o trabalho de Platt e colaboradores, in press na CELL, que gerou animais Cas9, o que trará uma nova revolução ao se utilizar esta técnica.

As principais vantagens de CRISPR-Cas9 em relação às tecnologias anteriores de edição genômica, como TALENT e Zinc-finger, são, principalmente, a facilidade técnica, o baixo custo e o curto período de tempo necessário para a obtenção de linhagens celulares ou mesmo animais geneticamente modificados .

Acredita-se que com o avanço dessa tecnologia, nos próximos anos será inevitável a execução de estudos de imunologia básica sem a geracão de linhagens celulares ou animais knockout ou knockin para a melhor comprensão dos mecanismos imunológicos.

Segue abaixo, sugestões de alguns artigos para aprofundamento sobre a tecnologia:

Cong L, Ran FA, Cox D, Lin S, Barretto R, Habib N, Hsu PD, Wu X, Jiang W, Marraffini LA, Zhang F. Multiplex genome engineering using CRISPR/Cas systems. Science. 2013 Feb 15;339(6121):819-23. doi: 10.1126/science.1231143. Epub 2013 Jan 3.

Hsu PD, Lander ES, Zhang F. Development and applications of CRISPR-Cas9 for genome engineering. Cell. 2014 Jun 5;157(6):1262-78. doi: 10.1016/j.cell.2014.05.010. Review.

Mali P, Yang L, Esvelt KM, Aach J, Guell M, DiCarlo JE, Norville JE, Church GM. RNA-guided human genome engineering via Cas9. Science. 2013 Feb 15;339(6121):823-6. doi: 10.1126/science.1232033. Epub 2013 Jan 3.

Platt RJ, Chen S, Zhou Y, Yim MJ, Swiech L, Kempton HR, Dahlman JE, Parnas O,  Eisenhaure TM, Jovanovic M, Graham DB, Jhunjhunwala S, Heidenreich M, Xavier RJ,

Langer R, Anderson DG, Hacohen N, Regev A, Feng G, Sharp PA, Zhang F. CRISPR-Cas9 Knockin Mice for Genome Editing and Cancer Modeling. Cell. 2014 Sep 24. pii: S0092-8674(14)01163-5. doi: 10.1016/j.cell.2014.09.014. [Epub ahead of print]

Ran FA, Hsu PD, Wright J, Agarwala V, Scott DA, Zhang F. Genome engineering using the CRISPR-Cas9 system. Nat Protoc. 2013 Nov;8(11):2281-308. doi: 10.1038/nprot.2013.143. Epub 2013 Oct 24.

Sander JD, Joung JK. CRISPR-Cas systems for editing, regulating and targeting genomes. Nat Biotechnol. 2014 Apr;32(4):347-55. doi:10.1038/nbt.2842. Epub 2014 Mar 2.

Por Caroline Junqueira